Síntese de Glicopeptídeos

Síntese de glicopeptídeos|Peptídeos Glicosilados|O-Glicopeptídeos Ligados|N-glicopeptídeos ligados|Ciência-Peptídeo

Meta descrição

Precisa de glicopeptídeos para pesquisa em glicobiologia ou mimetismo de glicoproteínas?Ciência-O serviço de síntese de peptídeosglicopeptídeos abrange ligação O-, ligação N-e introdução de glicanos complexos.20 anos de experiência, controle preciso de locais de glicosilação. Não hesite em contactar-nos.

Glicopeptídeos: simulando a glicosilação-do mundo real

Por que você usa glicopeptídeos?
As proteínas raramente ficam “nuas” no corpo - a maioria carrega açúcares. A glicosilação afeta o dobramento, estabilidade, reconhecimento e sinalização de proteínas. Se você quiser estudar a função de uma glicoproteína, ou desenvolver um anticorpo contra um epítopo de glicano, não basta ter um peptídeo nu, é preciso anexar os glicanos.

A dificuldade da síntese de glicopeptídeos reside na estrutura complexa da própria cadeia de glicano e na necessidade de garantir o local correto e a integridade da cadeia de glicano quando ligada ao peptídeo; A-conjugação é boa, mas as cadeias de glicano N-conjugadas são muito mais longas, o que faz com que a dificuldade de síntese seja diretamente duplicada. Já entramos nesses buracos antes e sabemos como contorná-los.

O que podemos fazer

1. Tipo de glicosilação: são feitas ligações O- e N-

Tipo	Método de conexão	Glicoconjugados Comuns	Já fizemos situações em que
O-glicopeptídeos ligados	Açúcar-ligado ao grupo hidroxila da cadeia-lateral Ser/Thr	GalNAc, GlcNAc, Gal, Homem	Transformei monossacarídeos em pentassacarídeos e obtive um rendimento estável
N-glicopeptídeos ligados	Açúcar-ligado à amida-da cadeia lateral de Asn	GlcNAc, tipo rico em manose, tipo complexo	O maior tempo que já fiz foram nove açúcares, o que requer estratégias especiais de proteção
Acidificação salivar	com ácido siálico no final	imitando locais de reconhecimento de glicoproteínas naturais	O ácido siálico desaparece facilmente. Otimizamos as condições

Dependendo dos seus objetivos de pesquisa, iremos definir qual estratégia de glicosilação é mais apropriada. O primeiro passo na síntese de glicopeptídeos é escolher a cadeia de açúcar e a ligação corretas.

2. Comprimento da cadeia de açúcar: de monossacarídeos a cadeias complexas de açúcar
Modificação de monossacarídeos: GlcNAc, GalNAc, Man, Gal, etc., mais simples e bem-sucedida.
Dissacarídeos/trissacarídeos: por exemplo, lactose e quitosana, precisam ser bem protegidos por doadores de glicosil.
Cadeias complexas de açúcares: tipo rico em manose, N-glicanos complexos, até nove açúcares.
Sialilação: A ligação terminal ao ácido siálico imita o local de reconhecimento das glicoproteínas naturais.

3. Controle de ponto: precisão, sem suposições
Qual é o maior medo da glicosilação? Glicoconjugação no local errado ou um local está conectado, mas o outro não. Com a nossa estratégia de proteção ortogonal, podemos introduzir a glicosilação num local específico e deixar os outros locais intactos. Precisa glicosilar vários locais? Podemos apresentá-los um por um e controlá-los com clareza.

4. Pureza: Dependendo dos Requisitos Experimentais

Nível de pureza	Cenários Aplicáveis
Puro convencional (85-95%)	Combinando triagem primária experimental e ativa
Alta pureza (95-98%)	experimentos celulares, validação funcional
Ultrapure (>98%)	estudos estruturais, RMN, cristalografia

Cada glicopeptídeo é acompanhado por relatórios de HPLC e MS, com dados que apoiam a integridade da cadeia de glicano e o local correto.

5. Outras modificações nos glicopeptídeos
Os glicopeptídeos são complexos o suficiente por si só, mas alguns experimentos exigem algo mais:
Rotulagem fluorescente: FITC, TAMRA, rastreamento do destino do glicopeptídeo.
Biotina: faça-download ou teste.
Fosforilação: Simulação simultânea de glicosilação e fosforilação para estudar crosstalk.
Rotulagem isotópica: para quantificação por RMN ou espectrometria de massa.

Por que escolher nosso serviço de Síntese de Glicopeptídeos?

1. Glicoquímica + síntese de peptídeos, abordagem-dupla
A síntese de glicopeptídeos é difícil porque cruza dois campos - glicoquímica e síntese de peptídeos. Quem fabrica açúcar pode não conhecer o peptídeo, e quem produz peptídeo pode não conhecer o açúcar. Temos gente dos dois lados, nós mesmos preparamos o doador de glicosil, otimizamos sozinhos as condições de glicosilação, não precisamos terceirizar e podemos ajustar os problemas sozinhos.

2. Estratégias flexíveis de proteção e integridade da cadeia do açúcar
Durante a glicosilação, a própria cadeia do açúcar deve ser protegida, caso contrário as condições de reação irão eliminar o açúcar. Temos várias combinações de grupos protetores que podem estabilizar a cadeia de açúcar sob condições de síntese peptídica e depois deixar o açúcar intacto quando é desprotegido na etapa final.

3. Controle do site: conecte-se onde quiser
Glicosilação em sítio único: o açúcar é introduzido em um local específico e deixado nu em outro lugar.
Glicosilação-multisítio: diferentes sítios podem transportar diferentes cadeias de açúcar, que podem ser introduzidas uma a uma sem interferir umas nas outras.
Glicosilação seletiva: existem múltiplos Ser/Thr, apenas um deles é glicosilado - alcançado por estratégia de conservação, não por probabilidade.

4. CQ: A cadeia do açúcar está intacta? Os sites estão corretos?
Os glicopeptídeos são mais problemáticos para o controle de qualidade do que os peptídeos normais:

Peso molecular do MS: você pode saber se o açúcar está ligado ou não olhando para ele.
MS/MS para ver o local (opcional): divida o peptídeo para ver a qual aminoácido o açúcar está ligado.
HPLC para ver a pureza:Procure também impurezas de desaçucarização.
Análise da composição do açúcar: Medição da composição e ligações da cadeia de açúcar quando necessário.
Os dados de cada glicopeptídeo são fornecidos a você, então você não precisa adivinhar.

5. De miligramas a cem miligramas, até o fim
Miligramas para a fase de triagem, dez miligramas para a fase de validação, cem miligramas para o estudo estrutural - podemos levar tudo. O mesmo projeto, a mesma contrapartida, sem necessidade de re-harmonização.

Para que podem ser usados os glicopeptídeos?

Áreas de pesquisa	Usos comuns	Tipo de glicosilação
Glicobiologia	Estudando como as proteínas{0}de ligação ao açúcar reconhecem o açúcar	O-conexão, N-conexão
Desenvolvimento de anticorpos	triagem de anticorpos contra epítopos de glicano	cadeias complexas de açúcar, acidificação salivar
Desenvolvimento de vacinas	antígenos de vacinas-conjugadas com açúcar	unidades repetidas de açúcar, acoplamento de glicopeptídeos
infecções virais	imitando glicoproteínas de superfície viral	Tipo n-ligado com alto teor de manose
Marcadores tumorais	peptídeos anormalmente glicosilados	açúcares O-de{0}}cadeia curta
vias de sinalização	mecanismos pelos quais a glicosilação afeta a função	Modificação de monossacarídeo
biologia estrutural	RMN ou estruturas cristalinas de glicoproteínas	cadeias homogêneas de açúcar, rotulagem isotópica

Biologia estrutural RMN/estrutura cristalina de cadeias homogêneas de açúcares de glicoproteínas, marcação isotópica

Entrega e controle de qualidade

Entrega: Pó liofilizado, tubos de centrífuga ou frascos, protegidos por nitrogênio.
Documentos de acompanhamento:COA (perfil HPLC + perfil MS), MS/MS (confirmação de locais de glicosilação).
Testes opcionais: teor de peptídeos, endotoxina, umidade, análise de composição de açúcar.
Embalagem Personalizada: porcionamento e marcação de acordo com sua necessidade.
Cada produto de síntese de glicopeptídeo é verificado duas vezes-antes de ser enviado para garantir que a cadeia de açúcar esteja completa e os locais estejam corretos.

Três casos-da vida real

Caso I: Um Instituto de Glicobiologia

O cliente precisa de um glicopeptídeo ligado a O-, que é anexado ao GalNAc em um local específico, para o estudo do reconhecimento de lectinas. Usamos síntese de fase sólida+glicosilação e modificação e, finalmente, MS/MS confirmou que o glicopeptídeo estava ligado ao Ser especificado. O cliente utilizou este glicopeptídeo para SPR e obteve a constante de ligação.

Caso 2: Programas de vacinas de empresas farmacêuticas multinacionais

The customer needed a batch of N-linked glycopeptide with high mannose-type sugar chain for anti-HIV vaccine research. We prepared the glycosyl donor by ourselves, optimized the glycosylation conditions, and delivered the final batch of N-linked glycopeptides with intact glycan chains and purity >95%, portanto os experimentos de imunização subsequentes do cliente ocorreram sem problemas.

Caso 3: Pesquisa de marcadores tumorais em uma universidade nacional

O cliente precisava de um glicopeptídeo contendo antígeno T{0}} sialilado para imitar a glicosilação aberrante na superfície das células tumorais. Introduzimos GalNAc sialilado e garantimos que o ácido siálico não fosse perdido durante o processo de síntese. O cliente usou este glicopeptídeo para rastrear anticorpos específicos.

Agora, e quanto às suas necessidades de glicopeptídeos?

Se você deseja glicopeptídeos simples modificados com monossacarídeos ou glicanos N-ligados complexos, podemos conversar. Pelo menos você não precisa procurar alguém dos dois lados quando pede à Ciência-Peptide para fazer a síntese de glicopeptídeos.

Preciso que você me diga:
sequências peptídicas
Locais de glicosilação e estruturas da cadeia de açúcar (referências são melhores)
Quanto (miligramas)
requisitos de pureza

Quando você quer?
Fornecer uma avaliação de viabilidade e orçamento em 24 horas.